光化學衍生反應無需加熱或長時間等待,通常在數秒至數十秒內完成。例如,柱后衍生模式下,樣品在流動過程中即可完成反應,縮短分析時間。此外,光化學反應的速率遠高于傳統熱化學或酶催化反應,尤其適用于高通量分析場景。光化學衍生器無需手動添加化學試劑,避免了衍生劑混合不均或劑量誤差的問題。例如,在線衍生系統可直接連接色譜柱和檢測器,實現全自動化流程。同時,設備維護簡單,無需頻繁清洗管路,降低了操作復雜度。
光化學反應的選擇性取決于目標分子對特定波長光的吸收能力。通過調整光源波長,可準確控制僅特定化合物發生衍生化,避免副反應干擾。例如,在復雜基質(如食品或環境樣品)中,光化學衍生可選擇性地增強目標物信號,同時抑制背景噪聲。與傳統化學衍生方法相比,光化學衍生無需使用大量有機溶劑或衍生劑,減少了有害廢物的產生。例如,黃曲霉毒素的分析中,光化學衍生依賴光照,無需任何化學試劑,既降低了成本,又避免了試劑殘留對檢測結果的干擾。
光化學衍生器的測定步驟:
1.準備工作:
-儀器連接:與液相色譜系統正確連接,一般置于色譜柱和檢測器之間,確保各部件之間的連接緊密,無泄漏。
-樣品準備:根據實驗要求,準備好待測樣品溶液,并進行適當的預處理,如過濾、稀釋等,以保證樣品的純度和均勻性。
-設定參數:根據待測物質的性質和分析要求,設置相關參數,如光源波長、光強、反應時間、流動相流速等。
2.開啟儀器:按照正確的順序依次開啟液相色譜系統,等待儀器穩定運行,使各部件達到設定的工作狀態。
3.進樣分析:將處理好的樣品溶液通過進樣器注入液相色譜系統,樣品在流動相的攜帶下依次經過色譜柱和光化學衍生器。在光化學衍生器中,樣品中的化合物在特定波長的光照射下發生光化學反應,轉化為易于檢測的物質。
4.數據采集與處理:經過衍生化后的樣品進入檢測器進行檢測,檢測器將檢測到的信號轉換為電信號,并傳輸至數據處理系統。根據檢測器的類型和實驗要求,選擇合適的檢測模式和數據處理方法,對采集到的數據進行分析和處理,得到待測物質的相關信息,如含量、濃度等。
5.結束實驗:完成所有樣品的分析后,按照正確的順序關閉液相色譜系統。對儀器進行清洗和維護,如清洗進樣器、色譜柱、光化學衍生器的反應池等,以保持儀器的清潔和性能穩定。